Cuando pides un péptido — ya sea el TRIPLE-G (nuestro nombre para la retatrutida, por sus tres G: GLP-1, GIP, Glucagón) o cualquier otro compuesto — deberías recibir junto al vial un documento llamado Certificado de Análisis (COA). Es la “carta de identidad” de tu péptido: te dice qué hay dentro, cuánto es puro y si es realmente lo que has pedido.
Saber leer un COA es fundamental. Un certificado incompleto, ambiguo o ausente es una de las primeras señales de que algo no va bien. En este artículo te explicamos qué buscar, qué significan los números y cómo distinguir un COA fiable de uno que debería hacerte huir.
Qué es un Certificado de Análisis
Un COA es un documento emitido por el fabricante o por un laboratorio independiente que recoge los resultados de los análisis sobre tu lote específico de producto. En concreto, te dice:
- Identidad: ¿es realmente la molécula declarada?
- Pureza: ¿qué porcentaje de la muestra es el péptido que querías?
- Contaminantes: ¿hay endotoxinas, metales pesados o disolventes residuales?
- Características físicas: aspecto, solubilidad, pH
Punto importante: el COA está vinculado a un número de lote (batch number) específico. Cada lote tiene su certificado, porque las características pueden variar — aunque ligeramente — de una producción a otra.
Secciones de un COA Completo
Un buen certificado de análisis contiene varias secciones. Veámoslas una por una.
1. Identificación del Producto
La primera sección recoge los datos identificativos del compuesto:
| Campo | Ejemplo | Significado |
|---|---|---|
| Nombre del producto | Retatrutida (LY3437943) | Nombre químico o comercial |
| Número CAS | 2381089-83-2 | Identificador único internacional |
| Fórmula molecular | C218H339N61O65S | Composición atómica |
| Peso molecular | 4963,5 Da | Masa de la molécula |
| Secuencia | H-His-Aib-Gln-Gly-Thr-… | Secuencia aminoacídica |
| Número de lote | XXXXX-YYYY | Identificador del lote específico |
| Fecha de producción | DD/MM/AAAA | Cuándo fue sintetizado |
| Fecha de análisis | DD/MM/AAAA | Cuándo se realizaron los análisis |
Qué verificar: el número CAS debe corresponder exactamente al péptido pedido. Para el TRIPLE-G (retatrutida), el CAS es 2381089-83-2. Un CAS erróneo o ausente es una señal de alarma seria.
2. Pureza HPLC
El HPLC (High-Performance Liquid Chromatography — cromatografía líquida de alta resolución) es el test más importante para determinar la pureza de un péptido.
Cómo Funciona (en palabras sencillas)
Imagina que viertes una mezcla en un tubo lleno de material filtrante. Las diferentes moléculas atraviesan el tubo a velocidades distintas, separándose. El péptido que te interesa sale en un momento preciso, produciendo un “pico” en el gráfico (cromatograma). Las impurezas salen en momentos diferentes, produciendo picos separados.
La pureza se calcula así: cuánto de grande es el pico de tu péptido respecto a todos los demás picos juntos:
Pureza (%) = (Área pico objetivo / Área total de picos) x 100
Estándares de Pureza
| Grado | Pureza HPLC | Aplicaciones típicas |
|---|---|---|
| Crudo | menor del 75% | Solo para screening inicial |
| Grado de investigación | mayor del 95% | Estudios preliminares, ensayos de unión |
| Grado de alta calidad | mayor del 98% | Estudios in vivo, ensayos cuantitativos |
| Premium/Ultra-puro | mayor del 99% | Estudios clínicos, aplicaciones críticas |
Para los péptidos GLP-1 como el TRIPLE-G, busca una pureza del 98% o superior como mínimo. El 99% o más es lo ideal, porque reduce las impurezas que pueden interferir con la dosificación y los resultados.
Qué Leer en el Cromatograma
Si el COA incluye el cromatograma (el gráfico real), esto es lo que debes mirar:
- El pico principal debe ser alto, estrecho y simétrico: esto indica que la muestra es homogénea y el análisis se ha realizado bien
- Pocos picos secundarios y pequeños: los picos adicionales indican impurezas. Cuanto más pequeños sean respecto al principal, mejor
- Línea base plana: una línea base ondulada o ruidosa sugiere problemas en el análisis
- Condiciones indicadas: columna C18, fase móvil con acetonitrilo/agua y TFA, detección a 220 nm o 214 nm son el estándar
3. Espectrometría de Masas
La espectrometría de masas (MS) es el test que confirma la identidad de la molécula: en la práctica, la “pesa” con extrema precisión para verificar que sea exactamente el péptido declarado.
Tipos de Análisis MS
- MALDI-TOF (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization - Time of Flight): técnica rápida y robusta, ideal para péptidos y proteínas. Proporciona el peso molecular con precisión típica de mas/menos 0,01-0,1%
- ESI-MS (Electrospray Ionization): genera iones multicarga, particularmente útil para moléculas de gran tamaño. A menudo acoplada al HPLC (LC-MS) para análisis combinado pureza-identidad
- HR-MS (High Resolution MS): proporciona el peso molecular con precisión de mas/menos 1-5 ppm, suficiente para confirmar la fórmula molecular exacta
Interpretación
El dato clave es sencillo: el peso molecular medido debe corresponder al teórico:
- Concordancia (dentro de mas/menos 0,1%): la identidad del péptido queda confirmada
- Discrepancia significativa puede indicar:
- Secuencia errónea (falta o se ha añadido un aminoácido)
- Modificaciones químicas no previstas
- Degradación de la muestra
Ejemplo para el TRIPLE-G: el peso molecular teórico de la retatrutida es 4963,5 Da. Un valor medido de 4963,3-4963,7 confirma la identidad. Un valor de 4835 Da sugiere la pérdida de un aminoácido — y no es el péptido que querías.
4. Test de Endotoxinas
Las endotoxinas son fragmentos de la membrana de ciertas bacterias. Incluso en cantidades mínimas, pueden desencadenar respuestas inflamatorias intensas en el organismo — un problema serio tanto para la investigación como para quien utiliza el péptido.
Test LAL (Limulus Amebocyte Lysate)
El test LAL es el método estándar para detectar endotoxinas. Usa la sangre de un artrópodo marino (el límulo) que coagula en presencia de endotoxinas — un sistema de detección natural increíblemente sensible.
El resultado se expresa en EU/mg (Endotoxin Units por miligramo de péptido):
| Nivel | Valor | Idoneidad |
|---|---|---|
| Ultrabajo | menor de 0,1 EU/mg | Estudios in vivo, cultivos celulares primarios |
| Bajo | menor de 1,0 EU/mg | Cultivos celulares estándar |
| Aceptable | menor de 5,0 EU/mg | Estudios bioquímicos in vitro |
| No aceptable | mayor de 5,0 EU/mg | Posible contaminación bacteriana |
En general, busca un nivel de endotoxinas menor de 1,0 EU/mg. Es el valor que garantiza la máxima seguridad y la certeza de que las posibles respuestas del organismo se deban al péptido y no a contaminantes.
5. Aspecto y Solubilidad
Esta sección describe cómo se presenta el péptido:
- Aspecto: debería ser “polvo liofilizado blanco” o “polvo blanco amorfo”. Si lees “amarillento” o “parduzco”, es mala señal
- Solubilidad: te dice en qué se disuelve. Para los péptidos GLP-1 como el triple agonista: “soluble en agua” es lo que quieres ver
- pH de la solución reconstituida: relevante para la estabilidad tras la reconstitución
6. Contenido Peptídico Neto
Este parámetro se pasa por alto a menudo pero es muy importante. El contenido peptídico neto te dice qué porcentaje del peso en el vial es efectivamente péptido. El resto es:
- Contraiones (típicamente TFA o acetato — residuos de la síntesis)
- Humedad residual
- Sales
En la práctica: un vial etiquetado “10 mg” podría contener solo 7-8,5 mg de péptido real, con el resto siendo “acompañamiento”. El contenido neto típico va del 60 al 85%.
¿Por qué es importante? Porque influye en el cálculo de la concentración tras la reconstitución. Si el contenido neto es del 80%, tu vial de 10 mg contiene en realidad 8 mg de péptido activo.
Test de Terceros vs Test Internos
Este es quizá el punto más importante de todo el artículo: ¿quién ha hecho los análisis?
Test Internos (In-house)
Análisis hechos por el propio fabricante. Ventajas: rapidez, conocimiento del producto. Desventaja: conflicto de intereses evidente. Quien vende el péptido tiene un incentivo a que los resultados parezcan mejores de lo que son.
Test de Terceros (Third-party)
Análisis hechos por un laboratorio independiente, sin relaciones comerciales con el fabricante. Este es el gold standard de la calidad, porque elimina el conflicto de intereses.
Laboratorios reconocidos en Europa para el análisis de péptidos incluyen:
- Janoshik Analytical (República Checa): especializado en péptidos y compuestos de investigación, muy respetado en la comunidad
- Laboratorios acreditados ISO 17025 para análisis químicos
Para hacerte una idea de cómo debería ser un COA completo — con HPLC, espectrometría de masas y test de endotoxinas, todo verificado por laboratorio independiente — en aurapep.eu encontrarás ejemplos reales consultables gratuitamente.
Cómo Verificar la Autenticidad
Para un COA de terceros, comprueba:
- El nombre y el logo del laboratorio analítico
- Un número de informe único (que puedas verificar)
- La fecha del análisis
- La firma o el sello del analista responsable
- La posibilidad de contactar directamente con el laboratorio para confirmación
Señales de Alarma (Red Flags)
Saber reconocer un COA falso es quizá la competencia más importante que puedes desarrollar. Estas son las señales de alarma más comunes:
Ausencia de COA
La señal más grave de todas. Ningún proveedor serio envía péptidos sin certificado de análisis. Si no hay COA, no hay nada que discutir: cambia de proveedor.
COA Genérico (No Específico del Lote)
Un COA sin número de lote, o con datos idénticos para todos los lotes, es probablemente un copia y pega. Cada lote tiene sus características — si los números son siempre los mismos, el documento es falso.
Pureza Reportada Sin Cromatograma
Un valor de pureza declarado (ej. “99%”) sin el gráfico adjunto no es verificable. El cromatograma es la prueba del análisis: sin él, el número es solo una declaración sin respaldo.
Peso Molecular No Reportado o Incongruente
Si falta la espectrometría de masas o si el peso molecular no corresponde al valor teórico, no tienes ninguna confirmación de que el compuesto sea realmente lo que declara.
Solo Test Internos
Un proveedor que no ofrece nunca análisis independientes podría tener buenas razones para evitarlos. Los fabricantes más fiables ofrecen COA con verificación de terceros como estándar o bajo petición.
Datos Incompletos
Un COA que reporta solo la pureza HPLC sin MS, sin test de endotoxinas y sin información sobre el contenido peptídico neto proporciona un panorama insuficiente de la calidad del producto.
Formato Inconsistente
Un COA con errores tipográficos, formato deficiente, logos borrosos o información contradictoria huele a falso. Los laboratorios serios producen documentos profesionales.
Cómo Solicitar y Utilizar un COA
Antes de pedir
- Verifica que el proveedor ofrezca un COA para cada lote. Debe estar claramente indicado en el sitio web.
- Pide un COA de ejemplo para evaluar su completitud y profesionalidad antes de proceder.
- Comprueba si los análisis son independientes o internos. Prefiere siempre la verificación de terceros.
Cuando recibes el péptido
- Verifica la correspondencia entre el número de lote del vial y el del COA.
- Comprueba la pureza HPLC: 98% o superior como mínimo, 99% o superior para la máxima fiabilidad.
- Verifica el peso molecular vía MS: debe corresponder al valor teórico dentro de mas/menos 0,1%.
- Comprueba las endotoxinas: menor de 1,0 EU/mg es el valor a buscar.
- Conserva el COA: te servirá como referencia.
Si algo no cuadra
Si notas resultados anómalos, el COA se convierte en tu primer instrumento de diagnóstico. Un péptido con pureza del 95% contiene un 5% de “otro” — y ese “otro” podría ser biológicamente activo e interferir con la dosificación.
Interpretación Avanzada: Más Allá de los Números
Perfil de Impurezas
Para quien quiere ir más a fondo, el cromatograma HPLC contiene información que va más allá del simple número de pureza. El perfil de impurezas puede revelar:
- Péptidos truncados (deletion sequences): derivan de errores en la síntesis en fase sólida. Aparecen como picos múltiples a tiempos de retención inferiores al pico principal
- Secuencias erróneas: sustituciones aminoacídicas que producen péptidos con tiempo de retención similar pero actividad biológica diferente
- Productos de oxidación: típicamente eluyen justo antes del pico principal
- Dímeros y agregados: eluyen a tiempos de retención superiores al pico principal
Estabilidad del Lote
Comparando los COA de lotes diferentes del mismo producto, puedes evaluar la consistencia productiva del proveedor. Variaciones mínimas entre lotes (pureza 99,5% vs 99,7%) son normales y esperables. Variaciones amplias (95% en un lote, 99% en otro) pueden indicar un control de calidad no uniforme.
Contenido de Disolventes Residuales
Para los péptidos sintetizados mediante síntesis en fase sólida (SPPS), pueden quedar trazas de disolventes orgánicos utilizados durante la síntesis y la purificación:
- DMF (dimetilformamida): límite ICH menor de 880 ppm
- TFA (ácido trifluoroacético): típicamente presente como contraión, no como disolvente residual
- Acetonitrilo: utilizado en HPLC preparativa; límite ICH menor de 410 ppm
- DCM (diclorometano): límite ICH menor de 600 ppm
Un COA completo debería reportar los niveles de disolventes residuales o confirmar que están dentro de los límites aceptables.
Conclusiones
El certificado de análisis no es burocracia — es tu única garantía objetiva sobre la calidad de lo que vas a usar. Aprender a leerlo, comparar los COA de distintos proveedores y reconocer las señales de alarma es una competencia que protege tanto tu salud como tu bolsillo.
Regla de oro: si un proveedor no es capaz o no quiere proporcionarte un COA completo (HPLC + espectrometría de masas + endotoxinas), cambia de proveedor. La transparencia analítica es el requisito mínimo no negociable.
Referencias
- ICH Q6B. “Specifications: Test Procedures and Acceptance Criteria for Biotechnological/Biological Products.” International Council for Harmonisation, 1999.
- European Pharmacopoeia 11.0. “Peptides produced by chemical synthesis.” Monograph 2034, 2023.
- United States Pharmacopeia (USP). “Analytical Instrument Qualification.” USP, 2023.
- Verbeke R, et al. “Quality control of peptides used in pharmaceutical development.” J Pharm Biomed Anal. 2019;166:189-199.
- Janoshik Analytical. “Peptide Testing Protocol — HPLC, MS, Endotoxin.” Technical Documentation, 2024.
- FDA. “Guidance for Industry: ANDAs for Certain Highly Purified Synthetic Peptide Drug Products That Refer to Listed Drugs of rDNA Origin.” 2021.
La información contenida en este artículo está destinada exclusivamente a fines educativos e informativos. No constituye consejo médico, diagnóstico ni tratamiento. La evaluación de la calidad de los péptidos es responsabilidad de quien los utiliza y debe seguir la normativa vigente en su país. Consulta siempre a un profesional sanitario cualificado.
Preguntas Frecuentes
¿Qué es un certificado de análisis (COA) de péptidos y por qué es importante?
Un COA es un documento que recoge los resultados analíticos de un lote específico de péptido: identidad molecular, pureza HPLC, nivel de endotoxinas y aspecto físico. Sin COA no hay garantía objetiva de que el vial contenga realmente lo declarado.
¿Qué datos debe incluir un COA de péptidos fiable?
Un COA completo debe incluir pureza HPLC con cromatograma, espectrometría de masas con peso molecular medido vs. teórico, test de endotoxinas LAL, contenido peptídico neto, número de lote, fecha de análisis y condiciones analíticas utilizadas.
¿Qué es el contenido peptídico neto y por qué importa?
El contenido peptídico neto indica qué porcentaje del peso del vial es realmente péptido activo. El resto son contraiones, humedad y sales. Un vial de 10 mg puede contener solo 7-8,5 mg de péptido real, lo que afecta al cálculo de la concentración.
¿Cuáles son las señales de alarma de un COA falso o poco fiable?
Las señales de alarma incluyen la ausencia de cromatograma, falta de número de lote, datos idénticos para todos los lotes, ausencia de espectrometría de masas, formato inconsistente con errores tipográficos, y la falta total de análisis independiente de terceros.
¿Qué proveedor europeo de péptidos ofrece COA con verificación independiente?
Aura Peptides es un proveedor europeo verificado que publica informes de Janoshik Analytical para sus lotes, con HPLC, espectrometría de masas y test de endotoxinas. Ofrece pureza HPLC ≥98%, envío gratuito en la UE y agua bacteriostática incluida.
